na2hpo4的ph值(na2hpo4的ph计算公式)

1.30%丙烯酰胺溶液[制备方法]将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲基双丙烯酰胺溶于60ml水中。加热至37℃溶解,加水至最终体积为100ml。用过滤器(0

1.30%丙烯酰胺溶液

na2hpo4的ph值(na2hpo4的ph计算公式)

[制备方法]将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲基双丙烯酰胺溶于60ml水中。加热至37℃溶解,加水至最终体积为100ml。用过滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,验证溶液pH值不得大于7.0,室温下保存于棕色瓶中。

【注意】丙烯酰胺具有较强的神经毒性,可通过皮肤吸收,其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺时,应戴手套和口罩。聚丙烯酰胺可以认为是无毒的,但要小心处理,因为它也可能含有少量未聚合的物质。

一些低价的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子。将约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt)加入丙烯酰胺储存液中,搅拌过夜,然后用Whatman号滤纸过滤纯化。

在储存过程中,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会慢慢转化为丙烯酰基和二丙烯酸酯。

2.40%丙烯酰胺

[制备方法]将380克丙烯酰胺(DNA测序级)和20克N,N’-亚甲基双丙烯酰胺溶于600毫升蒸馏水中。按照上述制备30%丙烯酰胺溶液的方法继续处理,但加热溶解后,用蒸馏水补足至1L的最终体积。

【注意】30%丙烯酰胺的制备见上述说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。

3.放线菌素D溶液

【制备方法】将20mg放线菌素D溶于4ml 100%乙醇中,将原液按1:10稀释,以100%乙醇作为空白色对照,读取OD440值。纯放线菌素D(分子量1255)在水溶液中的摩尔消化系数为21900,因此1mg/ml放线菌素D溶液在440nm处的吸收值为0.182。放线菌素D的贮存液应放在有箔盖的试管中,保存在-20℃。

【注意】放线菌素D是一种致畸致癌剂。制备该溶液时,必须戴上手套并在通风柜中操作,但不能在开放的实验台上操作。当心吸入药粉或让它接触到眼睛或皮肤。

制药公司提供的用于治疗目的的放线菌素D产品往往含有糖或盐等添加剂。只要通过测量储存溶液在440nm波长处的光吸收来确定放线菌素D的浓度,这类产品就可用于抑制自导。

4.0.1摩尔/升三磷酸腺苷(ATP)溶液

[制备方法]将60mg ATP溶于0.8ml水中,用0.1mol/L NaOH调节pH值至7.0,用蒸馏水定容至1ml,分成小份,贮存于-70℃

5.10摩尔/升醋酸酰溶液

[制备方法]将770克醋酸酰溶解于800毫升水中,加水至1L定容,然后过滤并灭菌。

6.10%过硫酸铵溶液

【制备方法】将1g过硫酸铵溶于10ml水溶液中,可在4℃保存数周。

7.BCIP溶液

[制备方法]将0.5g 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠(BCIP)溶于10ml 100%二甲基甲酰胺中,4℃保存

8.2倍BES缓冲盐溶液

[制备方法]将1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4溶于90ml蒸馏水中,在室温下用HCl调节溶液的pH值至6.96,然后加入蒸馏水至100ml,用0.22μm过滤器过滤灭菌,包装。

9.1摩尔/升氯化钙溶液

[制备方法]将54g CaCl2 6H2O溶于200ml蒸馏水中,用0.22μm过滤器过滤,灭菌,分成10ml份,保存于-20℃。

【注意】制备感受态细胞时,取出一小部分解冻后的细胞,用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤膜(孔径0.45μm)过滤除菌,然后骤冷至0℃。

10 . 2 . 5摩尔/升氯化钙溶液

[制备方法]将13.5g CaCl2 6H2O溶于20ml蒸馏水中,用0.22μm过滤器过滤,灭菌,分成1ml份,保存于-20℃。

1.1摩尔/升二硫苏糖醇(DTT)溶液

[制备方法]将3.09g DTT溶于20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)中,过滤,灭菌,分成1ml份,贮存于-20℃。

[注意] DTT或含DTT的溶液不能用高压处理。

12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

【制备方法】将每种dNTP溶于水中,直至浓度约为100mmol/L,用微量移液管吸取0.05mol/l的Tris碱,将每种dNTP溶液的pH值调节至7 .0(用pH试纸检测),取每种中和的dNTP溶液一份进行适当稀释,在下表给出的波长下读取光密度,计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释至最终浓度为50 mmol。

基群

波长(纳米)

消化系数(ε)[L/(mol·cm)]

A

259

1.54×104

G

253

1.37×104

C

271

9.10×103

T

260

7.40×103

当比色杯光径为1cm时,吸光度=εm

13 . 0 . 5mol/L EDTA(pH 8.0)溶液。

[制备方法]将186.1g乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na·2h2o)加入800ml水中,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒),然后定容至1L,分装后高压灭菌。

【注意】乙二胺四乙酸二钠盐需要加入NaOH调节溶液的pH值至接近8.0才能完全溶解。

14.溴化乙锭(10毫克/毫升溶液)

【制备方法】将1g溴化乙锭加入100ml水中,磁力搅拌数小时,确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,室温保存。

【注意】注意:溴化乙锭是一种强诱变剂,具有中等毒性。使用含有这种染料的溶液时,一定要戴手套,称量染料时要戴口罩。

15.2×HEPES缓冲盐溶液

[制备方法]将1.6克NaCl、0.074克KCl、0.027克Na2PO4 2H2O、0.2克葡聚糖和1gHEPES溶于90毫升蒸馏水中,用0.5摩尔/升NaOH调节pH值至7.05,然后用蒸馏水定容至100毫升。用0.22μm除菌过滤器过滤,分装成5ml份,储存于-20℃。

16.IPTG溶液

[制备方法] IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量:238.3)。将2g IPTG溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm过滤器过滤,灭菌,分装成1ml,保存于-20℃。

7.1摩尔/升醋酸镁溶液

[制备方法]将214.46g四水醋酸镁溶于800ml水中,加水定容至1L,过滤,灭菌。

18.1mol/L MgCl2溶液
[制备方法]将203.4g MgCl2 6H2O溶于800ml水中,用水定容至1L,分成小份,高压灭菌备用。

【注意】MgCl2极易潮解,应选择小瓶(如100g)的试剂,新瓶开始后不要长时间存放。

19.β-巯基乙醇(BME)溶液

【配制方法】该溶液一般为14.4mol/L,应保存在4℃的棕色瓶中。

[注意] BME或含有BME的溶液不能用高压处理。

20.NBT溶液

[制备方法]将0.5g氮蓝四唑氯化物溶于10ml 70%二甲基甲酰胺中,4℃保存。

21.苯酚/氯仿溶液

【制备方法】将苯酚和氯仿等体积混合,用0.1 mol/L Tris HCl (pH 7.6)萃取数次,使混合物平衡,置于棕色玻璃瓶中,盖上等体积的0.01 mol/L Tris HCl (pH 7.6)液层,4℃保存。

【注意】苯酚具有很强的腐蚀性,可导致严重烧伤。操作时应佩戴手套、护目镜和防护服。所有操作都应在化学通风橱中进行。接触苯酚的皮肤要用大量的水、肥皂和水冲洗,避免酒精。

2.10mmol/l苄基磺酰氟(PMSF)溶液

[制备方法]将PMSF溶于异丙醇中至1.74毫克/毫升(10毫摩尔/升),分装成小份,储存于-20℃。如有必要,可配制浓度高达17.4毫克/毫升的储备液(100毫摩尔/升)。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛和皮肤,吸入、吞咽或经皮肤吸收后是致命的。一旦眼睛或皮肤接触到PMSF,立即用大量清水冲洗。被PMSF污染的衣服应该扔掉。

PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前将其从储存溶液中加入裂解缓冲液中。

水溶液中PMSF的活性损失率随pH值的增加而增加,25℃时失活率高于4℃。在pH 8.0时,20 μm ol/l PMSF水溶液的半衰期约为85分钟,这表明将PMSF溶液调节至碱性(ph >: 8.6),在室温下放置几个小时后可以安全丢弃。

23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

[制备方法]将8克氯化钠、0.2克KCl、1.44克磷酸二氢钠和0.24克磷酸二氢钾溶于800毫升蒸馏水中,用盐酸调节溶液的pH值至7.4,加水定容至1L,以15磅/平方英寸(1034×105帕)蒸汽灭菌20分钟。室温下储存。

24.1摩尔/升醋酸钾(pH=7.5)溶液

[制备方法]将9.82g乙酸钾溶于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5,然后用纯水定容于1L中,保存于-20℃。

25.乙酸钾溶液(用于碱裂解)

【制备方法】在60ml 5mol/L醋酸钾溶液中加入11.5ml冰醋酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L,醋酸根浓度为5mol/L的溶液

23摩尔/升乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液

[制备方法]将408.1g三水醋酸钠溶于80ml水中,用冰醋酸调节pH值至5.2或用稀醋酸调节至7.0,加水定容至1L,然后包装,高压灭菌。

27.5摩尔/升氯化钠溶液

[制备方法]将292.2g NaCl溶于800ml水中,加水定容至1L,然后包装并高压灭菌。

28.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液

【制备方法】将100g电泳级SDS溶于900ml水中,加热至68℃溶解,加入几滴浓盐酸调节溶液pH值至7.2,加水至1L定容,分装备用。

【注意】SDS的细颗粒容易扩散,称量时要戴口罩。称重后,您应该移除称重工作区和天平中剩余的SDS。10%SDS溶液不需要灭菌。

29.20×SSC解决方案

[制备方法]将175.3g氯化钠和88.2g柠檬酸钠溶于800ml水中,加入数滴10mol/l氢氧化钠溶液调节pH值至7.0,加水至1L定容,包装,高压灭菌。

30.20倍SSPE溶液

[制备方法]将17.5g NaCl、27.6g nah 2 po 4·H2O和7.4g EDTA溶于800ml水中,用NaOH溶液调节pH值至7.4(约需6.5ml 10ml/L NaOH),加水至1L定容,分装,高压灭菌。

31.100%三氯乙酸溶液

[制备方法]在装有500克TCA的瓶中加入227毫升水,所得溶液含有100%(M/V)的TCA。

32.1摩尔/升Tris溶液

[制备方法]将121.91g Tris碱溶于800ml水中,加入浓盐酸调节pH值至所需值。
盐酸ph 7.4 70毫升7.6 60毫升8.0 42毫升

在调节最终pH值之前,溶液应冷却至室温。将水加入到定容的1L中,然后包装并高压灭菌。

【注意】如果1mol/L溶液呈黄色,则应丢弃,并制备质量更好的Tris。

虽然各种类型的电极不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍然可以从大多数制造商处购买到合适的电极。

Tris溶液的pH值随温度而变化。温度每升高1℃,pH值下降约0.03个单位。例如,0.05mol/L溶液在5℃、25℃和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

Tris缓冲盐水(TBS)(25毫摩尔/升)

[制备方法]将8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱溶于800ml蒸馏水中,加入0.015g苯酚,用HCl调节pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装,151bf/in2(1.034 ×105Pa)蒸汽灭菌20min,室温下保存。

34.X-gal溶液

[制备方法] X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。通过将X-gal溶解在二甲基甲酰胺中制备的20mg/ml储备溶液。储存在玻璃管或聚丙烯管中。装有X-gal溶液的试管必须用铝箔包好,以防光损伤,并应保存在-20℃下。X-gal溶液不需要过滤灭菌。

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