狭义的植物组织培养名词解释(植物组织培养名词解释题目)

1.培养基的制备

(1)母液的制备和保存

当组织培养数量较多时，尤其是工厂化生产时，为了操作方便，一般需要配制比所需浓度高10倍或100倍的母液，然后稀释10倍或100倍。

配制母液时，注意不要产生沉淀，容易沉淀的化合物主要是磷酸钙。此外，硫酸钙和磷酸锰也容易沉淀，一般不可逆，导致溶液无法使用。因此，在配制母液时，需要避免Ca2+与PO43-、Mn2+与PO43-、Ca2+与SO42-在高浓度下相遇。混合时要有顺序，把容易沉淀的试剂错开，稀释浓度混合，充分搅拌。比如MS与大量元素混合时，有KNO3、NH4NO3、MgSO4.2H2O、KH2PO4、CaCl.2H2O五种试剂。将五种成分分别溶解在五个烧杯中。先将前四种成分加在一起，然后加水至近900ml，再倒入近100ml溶解的CaCl.2H2O溶液定容至1000ml，这样该制剂就不会有沉淀产生。

铁盐必须单独配制，因为铁盐与其他母液混合时容易沉淀。硫酸亚铁、柠檬酸铁、酒石酸铁、氯化铁等。在早期文化中被使用。当这些溶液的PH值高于5.2时，容易形成Fe(OH)3沉淀，不容易被植物吸收。目前广泛使用的是螯合铁，即分别将硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠溶解，然后加热混合生成螯合NaFe-EDTA，不会产生沉淀，容易被植物吸收。

一般也可以将有机成分制成浓缩100倍的母液。在工厂生产中，几种有机成分可以混合在一起。但如果产量少，最好将有机物质分开，因为当几种有机成分混合在一起时，浓度越高，就容易发生霉变。

(2)植物生长调节物质的配置和保存

组织培养中常用的植物生长调节剂一般不能直接溶于水，其制备方法也不同。IAA、IBA、NAA和GA3可溶于少量95%的酒精中，然后用温蒸馏水定容。2，4-D可用少量1mol/ln NaOH溶解，然后加温水定容；6-BA、KT等细胞分裂素可先用少量1mol/L HCL溶解，再用热蒸馏水定容。如果它们没有很好地溶解，可以在水浴中慢慢加热小烧杯，轻轻摇动使其溶解。

生长调节物质的配置浓度可以是1mg/ml，例如称取50mg6-BA溶于50ml蒸馏水中，其浓度为1mg/ml；如果在1L培养基中加入1毫升，则其浓度为1毫克/升..配制完毕后，放入棕色试剂瓶中，贴上标签，存放在储药箱中备用。

一般植物生长调节物质价格都比较贵，而且容易氧化变质。准备时，不宜一次做太多或太高的浓度。一般植物生长调节物质的量可以在一个月内用完，保存在低温避光的地方。

(3)培养基的配置程序

培养基中的大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、生长调节物质、蔗糖和琼脂粉需分别配制后才能配制。

在制作培养基的过程中有几个细节需要注意:

首先，用于煮沸培养基的容器应具有自制的容量刻度标记。

其次，琼脂最好用蒸馏水浸泡1小时，加热融化后，加入培养基的其他成分，最后加入蔗糖。蔗糖溶解后，搅拌均匀并定容，调节pH值。

第三，在调节pH值时，用1mol/LNaOH(40g NaOH溶于1L水中)和1mol/LHCL84ml水定容至1L。培养基大多呈酸性，所以用NaOH调节pH值，用酸度计或精密pH试纸测量。通常高压灭菌后，酸度会增加0.2左右，调节pH值时要考虑到这一点。

第四，分装时不要将培养基粘在瓶口或瓶壁上，以免污染或不便观察。

第五，培养基配制后应立即高压灭菌，不能过夜。如果不能当天消毒，要放冰箱过夜再消毒。

二。接种室

接种室是对培养的植物材料进行灭菌的地方，对组织培养的成功至关重要。接种室应有洁净工作台、水管、抽水设备、放置培养皿的架子等。

洁净工作台分为单面、双面、双面、垂直和水平送风。洁净工作台由进风口、风机、出风口、无菌工作台等组成。进气口用于吸收和过滤进入风扇的空空气中的灰尘和污垢。通过进风口的空空气进入风扇，风扇通过出风口将空气送到出风口。出风口被细菌过滤器堵住了，细菌过滤器是超净平台最重要的部分。它的作用是吸收空空气中99%以上的细菌。出风口出来的空气应该是基本无菌的，所以它的质量决定了超净平台的质量。从出风口出来的无菌空气均匀的吹在无菌工作台的各个部位，好的洁净工作台在工作台各个部位的风量应该是一样的，这样才能保证无菌操作的可靠性。

根据工作和房间条件，可以购买不同类型的洁净工作台。工作台的摆放也可以根据实际情况灵活处理，但工作面不要对着门，也不要靠门太近。整个房间要配有缓冲室和双层门窗，防止灰尘和微生物滋生。室内最好安装紫外线灯或经常喷洒杀菌剂，抑制微生物过度生长。缓冲室和接种区之间应设置活动门。进入接种室前，工作人员应在缓冲室换好衣服、鞋帽，穿上工作服、口罩、防尘帽和拖鞋后才能进入接种区。进入接种区后，应随手关闭活动门。在接种区，尽量不要让非工作人员进入。进入后，工作人员不得在该区域走动或打闹，也不得在该区域吃东西或吸烟，以防止空气体被污染。

正式工作前，接种室的紫外灯要打开，洁净工作台及其顶部的紫外灯也要提前打开，至少提前20分钟，但不能太久。灭菌结束后，关掉紫外线灯，停一会儿再进入室内开始工作，因为紫外线灯产生的臭氧对人体有轻微的伤害。接种后应打扫接种室，更换的衣服、鞋帽、口罩要及时清洗，定期消毒。在没有条件的情况下，接种室没有缓冲室，但洁净工作台不能靠着门口或窗户放置。接种室最好保持恒温，有利于工作人员提高效率。其次，从培养室中取出的植物材料不会因为温度变化过大而影响生长。

三。配药室

植物组织培养需要几十种化学物质，这些化学物质的质量和保存直接影响培养效果。药品储存的环境条件严重影响药品的质量和有效期，如环境温度、湿度、光线等。为了满足这些条件，有必要建立一个单独的调剂室。调剂室的大小可以根据药品的数量和未来发展的规模来确定，但不能太小。最好常年保持相对较低的温度，要有良好的通风干燥条件。同时可以遮光，防止药品直接暴露在阳光下，因为有些药品在高温、高湿、日光下容易挥发、潮解、失效、变质。调剂室要有几个药柜，把固体药品和液体药品分开，大包装和小包装分开，常用药品和不常用药品分开，危险、易燃、易爆、腐蚀性药品和常用药品分开。药箱的结构设计要合理，药品要按照一定的顺序摆放，这样看起来一目了然，非常方便工作。同时，还应建立药品购买和使用档案，记录药品购买的日期和数量、药品使用的数量和日期以及使用者等。，以便于工作。

在药品质量方面，除非另有规定，用于组织培养研究的化学药品应为分析纯或更好，不能使用化学纯。为了省钱，降低成本，可以经过精心的预备实验，选择一些价格低廉的化学纯试剂或市售药物。药品的生产厂家直接关系到药品的质量。为了实验的准确性、可重复性和连续性，最好在固定的基础上从一些厂家购买一些药物。总的来说，进口药的质量比国产药好。虽然价格较高，但从节省时间、减少重复、提高实验精度等方面来看，总体上未必不经济。

在配药室里，除了药柜，还应该有一个实验台，必须坚固稳定，抗震性能好，因为实验台上面要放一个万分之一和百分之一的电子天平。有药勺、称纸、发刷、卫生纸等。用于称量试验台抽屉中的药物。刷子用于及时清理散落在天平上和天平周围的药品。用于清洁天平的刷子必须柔软且不易掉毛。擦药勺要用卫生纸。柔软、长纤维、质量好、灰尘和细菌含量高的卫生纸可能会给实验室带来意想不到的影响。称重要用专用纸，一些粗糙不干净的纸不要随便找，更不要说报纸了。不过房间里也要有一个大容量的储药箱，最好是分层的，这样可以用来存放激素、抗生素以及各种需要低温保存的物品。一些易燃、有毒的药物应单独大量使用。可以在调剂室的角落设置通风柜，存放这些特殊药品，进行特殊操作。一些干燥的、暂时不用或未充分利用的玻璃器皿或其他实验用品，如脱脂棉、滤纸、纱布等。，也可以存放在调剂室。这些物品应该分开存放在橱柜里。

组织培养所需药品的储存要求:

1.可在室温下常规储存的化学品

这类药物多为无机物，性质稳定，不易受微生物感染和温度影响，可常温保存。主要有:硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾等。

2.适合在零度和低温下储存的化学品。

这类药物多为有机物，易受微生物感染，对温度敏感，最好低温保存。主要有肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、抗坏血酸、生物素等。

3.药物、液体抗生素等。那应该保存在零下20度。