mirdb(MIB是什么意思)

【1分种秒懂要点】：【1分钟了解重点】:

1.首次鉴定出导致ITP骨髓间充质干细胞凋亡的关键miRNA miR-98-5p。

2.miR-98-5p可调控IGF-2BP1，促进ITP骨髓间充质干细胞凋亡；

3.miR-98-5p靶向IGF-2BP1，其下游的IGF-2/PI3K通路抑制和p53上调参与ITP骨髓间充质干细胞的凋亡调控；

4.全反式维甲酸(ATRA)可通过抑制miR-98-5p的表达来纠正ITP-MSCs的异常凋亡，为ATRA临床治疗ITP提供了理论依据；

5.该论文发表在《分子治疗-核酸》(if = 7.032)上。

通信作者章小蕙

章小蕙教授

教授，主任医师

副主任(兼)国家血液病临床医学研究中心办公室主任，北京大学血液病研究所副所长

请点击简历:国家中心PI:章小蕙

第一作者王亚南

王亚南的博士生

国家血液病临床医学研究中心，北京大学人民医院、北京大学血液病研究所博士生，导师:章小蕙教授。

研究方向:造血干细胞移植和凝血。

以第一作者在《分子治疗-核酸》、《Sci中国生命Sci》杂志上发表SCI论文两篇，申请国家发明专利两项。

在ASH会议上制作墙报交换

北京大学优秀博士论文获得者

miR-98-5p的过表达与ITP骨髓间充质干细胞的凋亡有关。

免疫相关性血小板减少性紫癜(ITP)是一种常见的自身免疫性出血性疾病，骨髓间充质干细胞(MSCs)的损伤可能参与其发病机制。北京大学血液病研究所团队此前的研究表明，ITP患者骨髓间充质干细胞的凋亡增加。微小RNA (MicroRNA)通过调节免疫、巨核细胞发育和血小板生成在ITP中发挥重要作用。然而，miRNAs在ITP骨髓间充质干细胞中的作用仍不清楚。前期，研究组分析了ITP骨髓间充质干细胞的mRNA和miRNA芯片。本研究中，我们重新分析了芯片数据，筛选出miR-98-5p可能是导致ITP骨髓间充质干细胞凋亡的关键miRNA。

MiR-98-5p在转录后抑制IGF2BP1

芯片分析显示凋亡相关基因IGF2BP1是miR-98-5p下游的直接靶点。通过miRDB比较miR-98-5p序列和igf2bp13UTR序列，预测了miR-98-5p与igf2bp13UTR结合的最可能位点，并通过荧光素酶报告基因实验进行了验证。检测IGF2BP1基因和蛋白在细胞中的表达水平。通过构建小干扰RNA(siRNA)来敲低细胞中IGF2BP1的表达，以验证IGF2BP1在ITP-MSCs中的作用。结果表明，miR-98-5p可能通过转录后靶向抑制IGF-2bp1介导ITP骨髓间充质干细胞的凋亡。

MiR-98-5p可通过抑制IGF-2/PI3K/Akt通路促进细胞凋亡。

胰岛素样生长因子(IGFs)在骨髓间充质干细胞的自我更新和发育中起着重要的作用。IGF2BP1介导的IGF-2 mRNA稳定且不降解，因此促进了IGF-2的表达。IGF-2通过与IGF-1受体(IGF1R)结合并激活下游PI3K/Akt通路发挥其生物学效应。接下来，我们研究了IGF-2/PI3K/Akt通路是否参与了ITP骨髓间充质干细胞的凋亡调控。与IGF-2相比，IGF1R对IGF-1具有更强的结合力。因此，我们同时检测了骨髓上清液中IGF-1和IGF-2的浓度。令人惊讶的是，ITP患者骨髓上清液中IGF-2的浓度明显低于对照组，但ITP患者和对照组之间IGF-1的浓度没有明显差异。进一步的实验表明，ITP-MSCs的PI3K/Akt通道活性降低。为了确定ITP-MSCs中IGF-2的减少和PI3K/Akt通道活性的降低是否是由miR-98-5p的过表达和IGF-2BP1的下调引起的，我们进行了更多的细胞转染实验。结果表明，miR-98-5p可以通过抑制IGF-2/PI3K/Akt通路的活性来调节ITP-MSCs的凋亡。

MiR-98-5p通过抑制β-TrCP介导的p53泛素化上调p53。

我们以前的研究表明p53上调参与了ITP-MSCs的凋亡调控。作为泛素连接酶复合体SCF的关键成分，β-TrCP介导p53的泛素化并促进p53的蛋白酶体途径降解。而IGF2BP1能稳定β-TrCP mRNA不被降解。因此，我们推测miR-98-5p可以靶向调节IGF2BP1，这可能通过抑制β-TrCP介导的p53泛素化而导致p53上调。为了验证我们的假设，我们进行了相关实验。结果显示，ITP骨髓间充质干细胞中β-TrCP mRNA和蛋白水平显著下调。P53水平显著上调，这与我们以前的研究结果一致。细胞转染结果显示miR-98-5p通过靶向调节IGF2BP1抑制ITP-MSCs中β-TrCP的表达。接下来，我们研究了β-TrCP介导的p53泛素化。有趣的是，β-TrCP介导的p53泛素化水平在ITP骨髓间充质干细胞中被明显抑制。我们继续验证miR-98-5p在p53泛素化中的作用。结果表明，miR-98-5p抑制β-TrCP介导的p53泛素化，导致ITP骨髓间充质干细胞p53蛋白表达上调。

miR-98-5p的过表达削弱了MSCs对ITP小鼠的治疗效果。

MSCs已被证明对ITP小鼠有益。为了更好地了解miR-98-5p在骨髓间充质干细胞中的作用，我们构建了ITP小鼠的活性模型，并将miR-98-5p过表达修饰的骨髓间充质干细胞注入ITP小鼠体内，观察其治疗效果。与对照组相比，骨髓间充质干细胞治疗组ITP小鼠的血小板在第8天和第12天显著升高。然而，用miR-98-5p-M转染的MSCs处理的ITP小鼠的血小板水平没有显著增加。用转染miR-98-5p-M的MSCs或转染miR-98-5p-NC的MSCs治疗的ITP小鼠的出血症状得到改善。这些结果表明，miR-98-5p的过表达削弱了MSCs对ITP小鼠的治疗作用，这进一步证明了miR-98-5p在MSCs中的关键作用。

ATRA纠正ITP骨髓间充质干细胞的凋亡

我们在以前的研究中报道了ATRA治疗激素抵抗/复发性ITP的疗效。也有相关研究证明了ATRA治疗ITP的可能机制。然而，ATRA对ITP-骨髓间充质干细胞的调节作用尚不清楚。为了澄清这个问题，我们将ATRA加入到ITP骨髓间充质干细胞的培养体系中。发现ATRA干预显著纠正了ITP间充质干细胞的凋亡。此外，ATRA干预下调了ITP骨髓间充质干细胞miR-98-5p的表达。因此，ATRA治疗后，IGF-2和β-TrCP的mRNAs表达均上调，PI3K/Akt通路的活性增强，β-TrCP介导的p53泛素化水平也上调。这些结果表明，ATRA在体外可以通过下调miR-98-5p来纠正ITP骨髓间充质干细胞的凋亡。总之，ATRA可能通过靶向抑制miR-98-5p来纠正ITP骨髓间充质干细胞的凋亡，有望成为治疗ITP病的潜在方法。

参考资料:

王，杨，张军，苏，杨，王，张，刘，陈，陈，吕，米，常，彭，侯，米，黄，x。张，谢(2020)。靶向IGF2BP1的miRNA-98-5p通过调节免疫性血小板减少症中的PI3K/ Akt和p53诱导间充质干细胞凋亡。分子疗法。核酸，20，764–776。https://doi.org/10.1016/j.omtn.2020.04.013